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服务类别:化工相关
服务城市:全国
服务说明

碘:
适用于不饱和或者芳香族化合物
配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。 或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶

高锰酸钾
适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛
配制方法 1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL . 使用期3个月

磷钼酸(PMA)
广谱
配制方法 10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇

紫外灯
适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物

硫酸铈
生物碱
配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液

氯化铁
苯酚类化合物
配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.

桑色素(羟基黄酮)
广谱, 有荧光活性
配制方法:0.1% 桑色素+甲醇

茚三酮
适用于氨基酸
配制方法:1.5g 茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸

二硝基苯肼(DNP)
适用于醛和酮
配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL + 200mL 乙醇

香草醛(香兰素)
广谱
配制方法:15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸

溴甲酚绿
适用于羧酸,pKa<=5.0
配制方法 :在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1MNaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。

钼酸铈
广谱
配制方法:235 mL + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1
广谱
配制方法:135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2
适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)
配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮: (1:10:20:80)

 

 

 

 

胺类物质常用的是:
1)磷钼酸显色剂:磷钼酸 5%-10% 乙醇溶液,淡黄色,久置变为浅绿色,不影响使用。浸板或喷板,加热,浅黄色背景,还原性物质显蓝绿色斑点,如果斑点太浓,可能显深黄色。
2CAM显色剂:钼酸铵9.6g,硫酸铈0.4g,10%硫酸水溶液 200ml,混匀,极淡的黄色溶液,棕色瓶密闭保存,喷板,加热,白色背景,还原性物质显深蓝色斑点。


显色的方法各种各样,主要根据化合物的性质选择不同的显色方法。许多关于植物有效成分提取与分离的书上都有介绍,通用的有碘、硫酸乙醇、香草醛-硫酸等,当然还有许多专用的显色剂,如:溴甲酚绿使有机酸显黄色,三氯化铁使酚羟基显蓝色,碘化铋钾使生物碱显桔黄色.....

显色剂化合物
苯胺邻苯二甲酸酯 碳水化合物,糖类
溴甲酚绿羧酸
二甲氨基苯甲醛 氨基酸,多肽
磷钼酸苯酚类
若丹明 类酯类

 

 

 

薄层层析常用显色剂配制及显色方法

附录

附录1 薄层层析及纸层析常用显色剂配制及显色方法

通用试剂
(1) 
重络酸钾-硫酸:检查一般有机物.
喷洒剂:5重络酸钾溶于100毫升40%硫酸中.
薄层检查:喷洒后加热到150至班点出现
(2) 
荧光素-:检查不饱和化合物
喷洒剂:0.1荧光素溶于100毫升乙醇中
溴试剂:5%的溴的四氯化碳溶液
喷洒后处理:喷洒荧光素溶液后,放置存有溴溶液的缸内,可于紫外线分析灯下检查荧光,荧光素与溴化和成曙红(Eosin)(无萤光),而不饱和化合物则成溴加成物,保留了原有荧光;若点样较多,则呈黄色斑点,底板呈红色.
(3) 
:检查一般有机物.
 
方法:a 层析谱放密闭缸内或瓷盘内,缸内预先放有碘结晶少许,大部分有机化合物呈棕色斑点。
B
层析谱放碘蒸气中5分钟(或喷5%碘的氯仿溶液)取出置空气中待过量的碘蒸气全部挥发后,喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
4)硫酸:通用
喷洒剂:5%的浓硫酸乙醇溶液,或15%浓硫酸正丁醇溶液,或浓硫酸-醋酸(11

喷洒后处理:空气中干燥15分钟,再热至110直至出现颜色或荧光。
5)硝酸银-氢氧化铵(Tollen-Zaffaroni)试剂:检查还原性物质。
溶液I : 0.1%N硝酸银; 溶液II: 5N氢氧化铵
喷洒剂: III1:5混合(临用前混合)
喷洒后处理: 105加热5~10分钟,至深黑色斑点出现.
 (6)
磷钼酸或磷钨酸,硅钨酸:检查还原性物质,类脂体,生物碱,甾体
喷洒剂: 5~10%磷钼酸或磷钨酸或硅钨酸乙醇溶液
喷洒后处理: 120加热至斑点出现.
沉淀试剂: 1硅钨酸溶于20毫升水中,10%盐酸至强碱性.


生物碱
  (7)
硫酸??=硫酸:检查生物碱及含碘化合物
 
喷洒剂: 0.1硫酸?混悬于4毫升水中,加入1三氯醋酸,加热至沸,逐滴加入浓硫酸至澄清.
 
喷洒后处理: 110加热数分钟至斑点出现.
  (8)
碘化铋钾(Dragendorff)试剂:检查生物碱及其他含氟化合物.
溶液I: 0.85次硝酸铋溶于10毫升冰醋酸40毫升水中
溶剂II: 8碘化钾溶于20毫升水中.
制备液I+II,等体积混合.可用于棕色瓶中保存较长时间,一般制备液可作沉淀试剂用.
喷洒液: 制备液1毫升与2毫升醋酸,10毫升水混合即得
(9).
碘化汞钾(Mayer)试剂: 检查生物碱.
制备液: 13.55氯化汞和49.8碘化钾各溶于20毫升水中,等体积混合并用水稀释至1000毫升.
喷洒液: 制备液加1/10体积的17%盐酸.
喷洒后处理: 观察斑点,并于紫外线荧光分析灯下检出.
(10) ?
酸纳-浓硫酸(Mandelin)试剂:检查生物碱.
1%>
酸纳的浓硫酸溶液.与多种生物碱呈不同颜色.
(11)
碘-碘化钾(Wagner)试剂:检查生物碱.
1碘及10碘化钾,
溶于50毫升水中,加热,2毫升醋酸,再用水稀释至100毫升.
可作纸层板显色剂,液可作沉淀试剂.


酚类,鞣质
 (12)
三氯化铁:检查酚类及??.
 
喷洒剂:1~5%三氯化铁的水溶液或乙醇溶液.并加盐酸少许.??酸呈红色斑点,酚类称蓝色或绿色斑点.
 (13)
铁氰化钾-三氯化钾:检查酚类,芳香胺类及还原性物质.
喷洒剂: 1%铁氰化钾水溶液,2%三氯化铁水溶液.临用前等体积混合.
喷洒后处理: 喷洒后酚性物质呈蓝色斑点.再喷2N盐酸,能使颜色加深,纸谱可用烯盐酸洗去喷洒液.
(14) 4-
胺基安替比林-铁氰化钾(Emerson反应): 检查酚类.
喷洒剂: I . 2%4-氨基安替比林乙醇溶液;
       II. 8%
铁氰化钾水溶液.
 
或用0.9%4-氨基安替比林和5.4%铁氰化钾水溶液
方法: 先喷洒I,再喷洒II,即显色,或再放入密闭缸中,缸内放25%氢氧化铵,即产生橙色至深红色.
(15)
对氨基苯磺酸,重氮盐(Pauly试剂): 检查酚类,芳香胺类及能偶合的杂环化合物.
 
喷洒剂: 4.5对氨基苯磺酸,加热溶于45毫升12N盐酸中,用水稀释至500毫升,10毫升稀释液用冰冷却,10毫升冷4.5%亚硝酸钠水溶液,015分钟(此试剂于0可保存3),用前加等体积1%碳酸钠水溶液.
一般重氮化试剂,也可用联苯胺,对硝基苯胺等.
(16)
对甲苯磺酸: 检查甾体,黄酮,鞣质.
喷洒剂: 20%对甲苯磺酸氯仿溶液.
喷洒后处理: 100加热数分钟,紫外线分析灯下检查荧光斑点.


含氧杂环及蒽醌类*

(17) 三氯化铝: 检查黄酮体.
喷洒1%三氯化铝乙醇液于紫外线荧光分析灯下检示,呈黄色荧光
(18)
碱式醋酸铅: 检查黄酮体.
喷洒剂: 饱和碱式醋酸铅(或饱和醋酸铅)水溶液.
于紫外线荧光分析灯下检查荧光斑点.
(19)
醋酸镁: 检查蒽醌甙,甙元及黄酮体
喷洒剂: 0.5%醋酸镁甲醇溶液
方法: 90加热5分钟,呈红色至紫色斑点.
(20)
氢氧化钾: 检查香豆素,蒽醌甙及甙元
喷洒剂: 5~10%氢氧化钾的甲醇溶液.
于日光及紫外线荧光分析灯下检示斑点.


萜类,甾体

(21) 三氯化锑(Carr-Price试剂): 检查甾体,萜类,皂类.
喷洒剂: 25三氯化锑溶于75氯仿中(亦可以用氯仿或四氯化碳的饱和溶液).
喷洒后处理: 100加热5分钟,于紫外线荧光分析灯下检示荧光.
(22)
五氯化锑: 检查甾体,萜类,皂甙.
喷洒剂: 五氯化锑-氯仿或四氯化碳(1:4),用前新鲜配制.
喷洒后处理: 120加热至斑点出现,并于紫外线荧光分析灯下检示.
(23)
香兰醛-硫酸: 检查高级醇类,酚类,甾体,萜类,芳香油.
喷洒剂: 1香兰素溶于100毫升浓硫酸,0.5香兰醛溶于100毫升硫酸-乙醇(4:1).
喷洒后处理: 室温或120加热观察显色斑点.
(24) 4-
二甲氨基苯甲醛,醋酸,磷酸(E.P.试剂): 检查? Azulene ?前体 Proazulene.
喷洒剂: 0.254-二甲氨基苯甲醛,溶于50毫升醋酸585%磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存数月)
  ?:
烃室温即成蓝紫色斑点,>前体于80加热10分钟出现蓝紫色斑点.
  (25)
氯胺T-三氯醋酸: 检查强心甙.
 
喷洒剂: I. 3%氯仿T水溶液新鲜制备.
         II. 25%
三氯醋酸乙醇溶液(能保存数天).
  10
毫升I40毫升II,用前混合.
 
喷洒后处理: 110加热7分钟,紫外线荧光分析灯下检示呈蓝色或黄色荧光
  

服务流程

 (26) 亚硝酸基铁氰化钠-氢氧化钠(Legal试剂): 检查不饱和内酯;甲基酮或活性次甲基,常用于强心甙
喷洒剂: 1亚硝基铁氰化钠溶于100毫升2N氢氧化钠-乙醇(1:1)的水溶液.
显红色或紫色斑点.
         (27) 3,5-
二硝基苯甲酸(Legal试剂): 检查强心甙,α,β-不饱和内酯.
喷洒剂: 13,5-二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇,加入1N氢氧化钾50毫升.
强心甙呈紫红色斑点.
 
糖类
(28)
邻苯二甲基苯胺: 检查还原糖.
 
喷洒剂: 0.93苯氨,1.66邻苯二甲酸溶于100毫升水饱和的正丁醇中.
 
喷洒后处理: 105加热10分钟.
(29) 2,3,5-Triphenyl-tetrazolium chloride (T.T.C.)
:检查还原糖及其他还原物质。
 
溶液I4%(T.T.C.)甲醇溶液;  溶液II1N氢氧化钠。
喷洒液:III,临用前等体积混合。
喷洒后处理:100加热510分钟,得红色斑点。
30Keller-Kiliani试剂:检查α-去氧糖,常用于强心甙。
试液:100毫升冰醋酸加三氯化铁试液0.5毫升混合均匀.
试样1毫克加试液2毫克溶解后,沿试官管壁滴入浓硫酸2毫升,接触面即显棕色,渐变浅绿,蓝色.最后冰醋酸层全部燃呈蓝色.
(31) 1,3-
二羟基萘-磷酸: 检查糖类.
喷洒液: 0.2%1,3-二羟基萘(Naphthoresorcinol)乙醇溶液100毫升,10毫升85%磷酸混合.

 

 

(32) 费林溶液(Fehling): 检查还原糖.
溶液I: 69.3结晶硫酸铜溶于1000毫升水中.
上述二溶液如不清可滤过.临用前等体积混合.

 
氨基酸
(33)
茚三酮: 检查氨基酸及氨基糖.
喷洒剂: 0.3茚三酮溶于100毫升正丁醇,加入3毫升醋酸;0.2茚三酮溶于100毫升乙醇(或丙酮中).
喷洒后处理: 110加热至斑点出现.
(34)
吲哚醌: 检查氨基酸和一些肽.
喷洒剂: 0.2%吲哚醌(Isatin)丙酮溶液,4%醋酸;或用100毫升1%吲哚醌丙酮溶液加10毫升醋酸.
喷洒后处理: 100~110加热10分钟.
(35) 1,2-
萘醌-4-硫磺酸(Folin试剂): 检查氨基酸.
喷洒剂: 新鲜制备0.021,2-萘醌-4-磺酸钠,溶于100毫升5%碳酸钠中.
喷洒后处理: 室温放于,不同氨基酸出现不同颜色.

有机酸

(36) 酸碱指示剂: 检查有机酸.
喷洒剂: 0.05%溴酚蓝(或溴甲酚绿,或溴麝香草酚蓝)的乙醇溶液.
(37)
氧化还原显色剂: 检查有机酸.
喷洒剂: I. 0.075%溴甲酚绿及0.025%溴酚蓝的无水乙醇液.
II. 0.5%
高锰酸钾及1%碳酸钠.10H2O的蒸馏水液.临用前,III1:1混合后喷酒.
喷酒后处理: 稳定时间为5~10分钟.对不同的有机酸在纸谱上呈现不同颜色.
(38) ??? (Acridine):
检查酸.
喷洒剂: 0.005%??乙醇溶剂.
紫外线分析灯下呈黄色荧光.
(39)
芳香胺-还原糖: 检查酸.
喷洒剂: 芳香胺(如苯氨5)和还原糖(如木质糖5)溶于50%含水乙醇中.
喷洒后处理: 125~130加热出现棕色斑点.

 


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